西寧臍帶干細(xì)胞儲(chǔ)存
發(fā)布時(shí)間:2023-03-12 01:30:24西寧臍帶干細(xì)胞儲(chǔ)存
上皮干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、肝干細(xì)胞,肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等多種細(xì)胞的能力。儲(chǔ)存流程是在新生兒娩出、胎盤(pán)剝離子宮排出后,專(zhuān)業(yè)婦產(chǎn)科醫(yī)師按照干細(xì)胞庫(kù)胎盤(pán)標(biāo)準(zhǔn)采集規(guī)程進(jìn)行胎盤(pán)的采集,然后放置在干細(xì)胞庫(kù)特定的裝置工具中,在 BACCS系統(tǒng)的監(jiān)控下及時(shí)運(yùn)送到干細(xì)胞庫(kù),由專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、提取、培養(yǎng)、檢測(cè)等技術(shù)流程,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果將符合標(biāo)準(zhǔn)的干細(xì)胞入庫(kù)保存。通用干細(xì)胞保存技術(shù)是將獲得的干細(xì)胞儲(chǔ)存在-196℃深低溫狀態(tài),保存上百年仍具有活性,胎盤(pán)干細(xì)胞庫(kù)在與客戶簽訂的合同期限內(nèi)對(duì)干細(xì)胞庫(kù)中所保管的胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞活性負(fù)責(zé)。
西寧臍帶干細(xì)胞儲(chǔ)存
抗原標(biāo)志表達(dá),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè) hUCMSC表達(dá)CD29、CD4、CD90、CD)05等表面標(biāo)志物(圖7-2),但不表達(dá)CD3、CD4、CD8、CD14、CD34、CD45等造血細(xì)胞的表面標(biāo)志也不表達(dá)與人白細(xì)胞抗原(HLA)識(shí)別有關(guān)的MHC-Ⅱ和CD40和CD80等共刺激分子。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一群來(lái)源中胚層,主要存在于結(jié)締組織和器官間質(zhì)中,具有自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,依據(jù)國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)定義的標(biāo)準(zhǔn),它的鑒定主要包括以下三個(gè)方面:1.細(xì)胞形態(tài)特征,長(zhǎng)梭形、旋渦狀貼壁生長(zhǎng)的成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞形態(tài)
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②與間充質(zhì)干細(xì)胞等其他干細(xì)胞相比,造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增效率低下,難以通過(guò)體外培養(yǎng)來(lái)達(dá)到臨床治療需要的數(shù)量;③異基因造血干細(xì)胞移植存在免疫排斥問(wèn)題,只有部分患者能夠找到HLA基因型相合的造血干細(xì)胞,因此需要擴(kuò)大臍血庫(kù)的容量;④臍血干細(xì)胞是一種有用的資源,但應(yīng)用范圍有限,一些臍血庫(kù)存在夸大宣傳之嫌。3.胚胎干細(xì)胞庫(kù)胚胎干細(xì)胞庫(kù)( embronic stem cell bank)是專(zhuān)門(mén)規(guī)模化從事收集、制備、鑒定、儲(chǔ)存和提供胚胎干細(xì)胞的場(chǎng)所和平臺(tái),同時(shí)也是進(jìn)行ES細(xì)胞研究的基地。國(guó)內(nèi)外開(kāi)展人和動(dòng)物ES研究的報(bào)道較多,但真正建成且形成一定規(guī)模并能提供ES細(xì)胞的專(zhuān)職ES細(xì)胞庫(kù)較少,
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編號(hào),初篩,核對(duì)并在兩小時(shí)內(nèi)送到細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行制備處理,臍帶運(yùn)輸箱的溫度一般應(yīng)維持在4~8℃,可在運(yùn)輸箱內(nèi)放置干冰以維持低溫環(huán)境,運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避免激烈震蕩。采集過(guò)程應(yīng)采取措施保護(hù)供者的健康和安全,并通過(guò)無(wú)菌技術(shù)操作大限度降低污染、感染和病原傳播的風(fēng)險(xiǎn)。采集用的接觸采集物的試劑和物料應(yīng)無(wú)菌、符合臨床安全標(biāo)準(zhǔn),且在有效使用期內(nèi)。需由制備機(jī)構(gòu)提供的無(wú)菌試劑和物料,應(yīng)經(jīng)過(guò)制備機(jī)構(gòu)質(zhì)量控制部門(mén)的驗(yàn)證并合格。
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包括心血管疾病和腫瘤等)相關(guān)信息進(jìn)行詳細(xì)采集。必要時(shí)需要收集供者的AB血型、HLA-1類(lèi)和Ⅱ類(lèi)分型資料,以備追溯性查詢(xún)。不得使用既往史中患有嚴(yán)重的傳染性疾病和家族史中有明確遺傳性疾病的供者作為異體干細(xì)胞來(lái)源。6.醫(yī)師或護(hù)士等待胎兒娩出后,常規(guī)結(jié)扎處理臍帶,在距斷段20-40cm處消毒后剪短,輕輕擠凈血管中的血液,生理鹽水沖洗干凈,裝入預(yù)先裝有保存液的密閉一次性容器中,并貼上特制標(biāo)簽,標(biāo)簽上詳細(xì)注明相關(guān)臨床信息。臍帶采集成功交由專(zhuān)職人員進(jìn)行登記,
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保證在無(wú)菌環(huán)境中操作,減少操作過(guò)程對(duì)細(xì)胞的影響和避免操作污染。為避免攜帶病原處于潛伏期難以檢測(cè)到的問(wèn)題,好在潛伏期后、完成細(xì)胞制備(入庫(kù)前)等環(huán)節(jié)釆取多種方法重復(fù)檢測(cè),以確保排除傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)。長(zhǎng)期傳代擴(kuò)增需要在培養(yǎng)體系中添加維持“干”性的和促進(jìn)生長(zhǎng)的細(xì)胞因子,如SCF、bFCF等,以維護(hù)其活性。選擇合適的細(xì)胞保存液對(duì)維持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性也極為重要,研發(fā)更有效的間充質(zhì)干細(xì)胞凍存劑仍然是間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)及相關(guān)工作者的重要課題,一些細(xì)胞庫(kù)在現(xiàn)有凍存劑的基礎(chǔ)添加DMSO、白蛋白和細(xì)胞因子等對(duì)保持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性有一定幫助。