UCMSC的分離是指釆用機械、酶消化或組織培養法等獲得單細胞懸液,然后通過貼壁培養的方法從中純化獲取間充質干細胞的過程。由于間充質干細胞具有貼壁生長的特性,尤其在塑料培養瓶中生長良好,因此西安干細胞公司可利用簡單的塑料培養瓶進行貼壁培養即可去除大部分的雜細胞,獲得純度相對高的 UCMSC。
采集獲得的新鮮臍帶組織,用生理鹽水或平衡液洗滌,必要時用含有青霉素/鏈霉素的生理鹽水或平衡液(雙抗)浸泡5~10分鐘以便將污染風險降到最低,再用組織均漿器粉碎或眼科剪剪碎或將組織置于液氮中研磨碎(剪碎前通常以機械方式剝離臍帶外膜和血管),然后進行原代分離培養。
原代分離常用的方法有微組織塊貼壁培養法、臍帶勻漿膠原酶消化法、改良膠原酶消化法等。為去除雜質,通過勻漿或酶消化后的細胞懸液,一般應采用100目的濾網進行過濾后再用于分離培養。間充質干細胞的純化主要采用貼壁傳代培養、差速貼壁、流式細胞分離術、免疫磁珠分離法等方法,可獲得純度大于99%的相對均一的間充質干細胞。
為了獲得合格的 UCMSC,西安干細胞公司必須在合格的操作環境(如細胞工程實驗室百級操作臺)下使用合格的細胞制備用品(如無菌的培養液、無毒的細胞培養瓶等),由具備細胞制備技術操作技能的工作人員嚴格按照細胞分離擴增操作規范進行。因此,分離擴增 UCMSC必須從源頭開始建立質量標準和技術規范。