傳代臍帶間充質干細胞核型穩定性檢測分析【免疫細胞存儲】

2022-06-13 15:10:35

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臍帶間充質干細胞通常按原代培養密度1:3的比例進行傳代培養。傳代培養至第3代，即可獲得相當數量的UCMC。免疫細胞存儲通過消化和傳代培養細胞，可以淘汰非間充質干細胞，因此，傳代培養的過程就是純化間充質干細胞的過程。然而，長期在體外傳代培養的UCMSC是否會衰老、突變等一直是人們關注的問題，也是影響細胞質量的深層次問題。國外對骨髓間充質干細胞體外長期培養研究發現：如果在體外連續傳代培養60次以后就會觀察到間充質干細胞衰老和自動向脂肪細胞分化。

免疫細胞存儲

筆者長期培養實驗證明：在體外傳代培養8次以內的臍帶間充質干細胞安全性和活性是有保證的。連續傳代8次以后，個別細胞會發生染色體變異。因此，體外傳代培養第3~5代獲得的 UCMSC不僅純度高、活性好，更重要的是安全性高，細胞核型穩定性好。目前研究顯示，體外培養的人骨髓間充質干細胞可發生自發轉化，脂肪間充質干細胞傳代培養后染色體發生改變，小鼠間充質干細胞經體外培養后，出現染色體畸變。

這些研究表明，不同來源的間充質干細胞經體外培養后，遺傳學特性可能會發生改變。同時也有研究顯示，小鼠骨髓間充質干細胞體外培養至50代仍未發生染色體改變。因此，免疫細胞存儲在臍帶間充質培養的過程中，必須監測其核型的穩定性，尤其是如果按照臨床應用級別制備的 UCMSC注射液，則必須檢驗鑒定 UCMSC的染色體，預防遺傳突變威脅到臨床使用的安全性。