【細胞存儲】人臍帶間充質干細胞的鑒定

2022-08-08 16:12:31

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臍帶間充質干細胞是一群來源中胚層，主要存在于結締組織和器官間質中，細胞存儲具有自我更新和多向分化潛能的干細胞，依據國際細胞治療協會定義的標準，它的鑒定主要包括以下三個方面:

1.細胞形態特征，長梭形、旋渦狀貼壁生長的成纖維細胞樣細胞形態(圖7-1)。

圖7-1 hUCMSC在倒置相差顯微鏡下的形態特征

2.抗原標志表達，流式細胞技術檢測 hUCMSC表達CD29、CD4、CD90、CD)05等表面標志物(圖7-2)，但不表達CD3、CD4、CD8、CD14、CD34、CD45等造血細胞的表面標志也不表達與人白細胞抗原(HLA)識別有關的MHC-Ⅱ和CD40和CD80等共刺激分子。

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圖7-2 hUCMSO的免疫表型分析

3.多向誘導分化潛能， hUCMSC在不同誘導條件下可分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等多種類型細胞。 hUCMSC在成脂分化誘導液中培養28天后，可形成大量脂滴，經油紅0染色為典型的紅色(圖7-3A)；同樣，在成骨分化誘導液中培養2天后，鈣質沉積結節可形成白色結節，經茜素紅染色為典型的紅色(圖7-3B)；細胞存儲采用細胞團塊培養方法，在成軟骨分化誘導液中培養14天后，可形成軟骨特有的氨基葡聚糖，經阿新藍染色為典型的藍色(圖7-3C)，表明 hUCMSC具備向脂肪、骨、軟骨分化的能力。