從干細胞的定義可知：干細胞的一個獨特生物學特性就是具有分化潛能，這也是其用于疾病治療和發育生物學研究的價值所在。 UCMSC在體內特定的組織微環境或體外特定的誘導培養條件下，可以分化為脂肪、骨、軟骨等組織細胞，公認的 UCMSC分化潛能鑒定標準就是誘導向脂肪、骨和軟骨細胞分化，以便鑒定 UCMSC是否具有多向分化能力。

成脂分化鑒定

1.主要試劑

(1)臍帶間充質干細胞成脂誘導分化培養基A液(誘導培養基)：造血干細胞存儲臍帶間充質干細胞成脂誘導分化培養基A液基礎培養基175ml胎牛血清20ml、雙抗2ml、谷氨酰胺2ml、胰島素400μ、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤200μ、羅格列酮200μul、地塞米松200u。

(2)臍帶間質干細胞成脂誘導分化培養基B液(維持培養基)：臍帶間充質干細胞成脂誘導分化培養基A液基礎培養基175ml、胎牛血清20ml、雙抗2ml、谷氨酰胺2ml、胰島素400u

(3)其他：油紅O、六孔板、PBS、中性甲醛。

2.步驟

(1)當培養的臍帶間充質干細胞融合度達到80%~90%時，胰酶消化收集。

(2)將消化下來的細胞按照2×10clcm2的細胞密度接種在六孔板中，將細胞置于37℃,5%CO2的培養箱中進行培養。

(3)每隔3天換液，直到細胞融合度達到100%或者過融合。造血干細胞存儲建議選擇過融合狀態的細胞做成脂誘導分化鑒定。

(4)小心的將間質干細胞完全培養基吸走，向六孔板中加入事先配好的2m臍帶間質干細胞成脂誘導分化培養基A液。

(5)誘導3天后，吸走六孔板中的A液，加入2ml臍帶間質干細胞成脂導誘分化培養基B液。

(6)24小時后，吸走B液，換回A液進行誘導。

(7)A液和B液交替作用3~5次后(12~20天)，繼續用B液維持培養4~7天直到脂滴變得足夠大、圓。B液維持培養期間，每隔3天需要換用新鮮的B液。

(8)成脂誘導分化結束后，吸走六孔板中的成脂誘導分化培養基，用PBS沖洗1-2次每孔加入2ml4%中性甲醛溶液固定30分鐘。

(9)吸走中性甲醛溶液，用PBS沖洗2次。造血干細胞存儲每孔中加入1m油紅O染料工作液染30分鐘(工作液配制方法：油紅O貯存液：蒸餾水=3:2，混勻后用中性濾紙過濾即可)。

(10)吸走油紅O染液,用PBS沖洗2~3次。

(11)將培養板置于顯微鏡下觀察成脂染色效果，并拍照。

3.結果分析臍帶間充質干細胞經過成脂分化誘導后，經油紅O染色，可見明顯紅色脂滴。