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1.取體外傳代培養至第3代的人臍帶間充質干細胞，用6孔細胞培養板和完全培養基進行傳代培養，帶細胞生長密度達到70%時開始進行誘導培養，設3個復孔，同時設對照孔。
2.吸管吸出培養液，加入復方電解質衡液3ml，輕輕晃動使死細胞及細胞碎片漂浮，造血干細胞存儲然后吸除上清液,反復2次。
3.加入誘導培養基進行誘導培養。誘導培養基：無血清 neurobasal培養基，含2%N2/B27, 10ng/mIEGF, 10ng/mIbFGF。
4.置于5%CO2、溫度37℃、造血干細胞存儲飽和濕度的細胞培養箱中進行靜置誘導培養，每3天按上述濃度補充誘導因子1次，每6天換1次培養液，連續18天，動態觀察細胞形態變化。
5.更換培養液為神經元細胞誘導培養基，培養體系為：含5%胎牛血清的DF12培養基添加誘導因子,10 ng/mlEGF,10 ng/mlbFGF,10 DuM Forskolin,0.5uM全反式維A酸,01mMIBMX,1Ong/ MIBNDF。
6.置于5%CO2、溫度37℃、飽和濕度的細胞培養箱中進行靜置誘導培養8天，每3天換1次液，觀察細胞形態學變化并拍照記錄。
7.用 Nestin、 NeuroD1、MAP2、NF-M單克隆抗體對誘導細胞進行免疫組織化學染色。造血干細胞存儲方法：用吸管去除培養液→PBS漂洗3次→4%甲醛固定30分鐘→用兔血清封閉→加入一抗(NES和MAP1:50, NeuroD1和NFM1:100)→于4℃條件下浮育過夜→加入PCT標記二抗→于室溫條件下浮育30分鐘→光學顯微鏡下觀察并拍照記錄(圖6-8)。
