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(二)體內致瘤試驗：采用 hUCMSC接種免疫缺陷小鼠法
1.設計原則及方案致瘤性是指將待檢細胞接種動物后，誘導動物本身細胞形成腫瘤的特性。對于異體來源的干細胞制劑或經體外復雜操作的自體干細胞制劑應該檢驗細胞的致瘤性。造血干細胞存儲
2.細胞及動物的準備
(1)接種動物：可采用新生(出生3日齡內)裸鼠或新生倉鼠及新生大鼠，分成3個組進行致瘤性檢查。
(2)待檢細胞: hUCMSC。
(3)陰性對照(MRC-5細胞)的配制：將細胞消化后吹打分散成單細胞懸液，充池計數細胞，然后用生理鹽水重懸細胞為一定濃度備用。也可根據具體情況而定，可采用PBS作為陰性對照。設置陰性對照可監測接種動物的自發腫瘤發生頻率。
(4)陽性對照(Hela細胞)的配制：方法同上。
3.操作方法采取在裸鼠右前肢腋窩皮下緩慢單次接種0.2ml只。造血干細胞存儲
4.結果觀察及分析
(1)每周觀察并觸摸接種部位是否有結節形成，應至少觀察4個月。
(2)觀察期內如有1個或多個結節出現，則應每周雙向測量結節大小并記錄結果，以確定結節是進行性生長、保持穩定不隨時間而消退。有進行性結節生長的動物，當結節達到直徑約2cm或國家規定的大小時應處死。
(3)觀察期末，處死所有動物，肉眼及顯微觀察接種部位或其他部位是否有瘤形成。任何疑似瘤均應采用4%濃度甲醛溶液固定后進行組織學檢查
(4)顯微檢査肝、心、肺、脾及局部淋巴結是否存在轉移性損傷。造血干細胞存儲如有腫瘤形成，則要分析與接種部位原發瘤的相關性，如組織學檢查顯示與原發瘤不同，則要考慮可能有自發瘤形成,這種情況需跟蹤結果。
